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    支原体PCR检测试剂盒

    • 更新时间:  2019-05-24
    • 产品型号:  
    • 简单描述
    • 支原体PCR检测试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
    详细介绍

    反应五要素:
    参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2
    引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
    ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
    ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
    ③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
    ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
    ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
    ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
    引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

    产品名称

    支原体PCR检测试剂盒

    英文名称

     

    分类

    PCR检测试剂盒

    特点:
    高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
    高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
    操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
    高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

    样品 DNA 的制备:
    1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
    稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
    2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
    3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
    4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
    6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
    7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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    使用及效果:
    PCR反应特点
    (1) 特异性强
    PCR反应的特异性决定因素为:
    ①引物与模板DNA特异正确的结合;
    ②碱基配对原则;
    ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
    ④靶基因的特异性与保守性。
    其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
    (2) 灵敏度高
    PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
    (3) 简便、快速
    PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
    (4) 对标本的纯度要求低
    不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

    P3单克隆抗体 英文名:Anti-XPNPEP3 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗ATG3单克隆抗体 英文名:Anti-ATG3 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗NEK9单克隆抗体 英文名:Anti-NEK9 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗SET7单克隆抗体 英文名:Anti-SET7 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗KIF2C单克隆抗体 英文名:Anti-KIF2C mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗HSPBP1单克隆抗体 英文名:Anti-HSPBP1 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗PTPN1单克隆抗体 英文名:Anti-PTPN1 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    小鼠抗SSR1单克隆抗体 英文名:Anti-SSR1 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    筋骨草甾酮C Ajugasterone C 23044-80-6 10mg 
    去氢毛钩藤碱 Hirsuteine 35467-43-7 5mg 
    前杯苋甾酮 Precyasterone 27335-85-9 10mg 
    假人参皂苷RT1  Pseudoginsenoside RT1 98474-74-9 10mg 
    2''-O-p-反式香豆酰基荭草苷 Orientin 2’’O-p-trans-coumarate 73815-15-3 5mg 
    2''-O-p-香豆酰基牡荆素  Vitexin 2’’-O-p-coumarate 59282-55-2 5mg 
    日当药黄素  Swertiajaponin 6980-25-2 10mg 
    商陆皂苷辛 Esculentoside H 66656-92-6 20mg
    商陆皂苷T Esculentoside T  20mg 
    4'-O-甲基补骨脂查耳酮B 4'-O-Methylbroussochalcone B 20784-60-5 10mg 
    (7S,7'R)-双(3,4-亚甲二氧苯基)-rel-(8R,8'R)-二甲基四氢呋喃  rel-(8R,8'R)-dimethyl-(7S,7'R)-bis(3,4-methylenedioxyphenyl)tetrahydro-furan 178740-32-4 10mg 
    异补骨脂色烯查耳酮 4-Hydroxylonchocarpin 56083-03-5 10mg 
    番泻苷A标准品 英文名称Sennoside A 规格 :20mg CAS:81-27-6 进口、国产
    番泻苷B标准品 英文名称Sennoside B 规格 :20mg CAS:128-57-4 进口、国产
    芝麻油标准品 英文名称Sesame Oil (AS) 规格 :1ml×2ampules CAS:8008-74-0 进口、国产
    芝麻油相关物质B标准品 英文名称 规格 :6mg×3vials CAS:64550-34-1 进口、国产
    芝麻油相关物质A标准品 英文名称 规格 :6mg×3vials CAS:2190-21-8 进口、国产
    L-丝氨酸标准品 英文名称L-Serine 规格 :200mg CAS:56-45-1 进口、国产
    盐酸舍曲林外消旋混合物标准品 英文名称 规格 :25mg CAS:79617-89-3 进口、国产
    盐酸舍曲林相关物质A标准品 英文名称 规格 :25mg CAS: 进口、国产
    盐酸舍曲林标准品 英文名称Sertraline Hydrochloride 规格 :100mg CAS:79559-97-0 进口、国产
    七氟烷标准品 英文名称Sevoflurane 规格 :1ml CAS:28523-86-6 进口、国产
    支原体PCR检测试剂盒七氟烷相关物质A标准品 英文名称 规格 :0.2ml CAS:58109-34-5 进口、国产
    枸橼酸西地那非标准品 英文名称 规格 :100mg CAS: 进口、国产
    七氟烷相关物质B标准品 英文名称 规格 :0.2ml CAS:13171-18-1 进口、国产
    兔抗GPR1多克隆抗体 英文名:Anti-GPR1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    兔抗PRLHR多克隆抗体 英文名:Anti-PRLHR rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    兔抗P2RY14多克隆抗体 英文名:Anti-P2RY14 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
    兔抗GPR119多克隆抗体 英文名:Anti-GPR119 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光

     


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